Effect of tetrahydroquinoline derivatives on the intracellular Ca2+ homeostasis in breast cancer cells (MCF-7) and its relationship with apoptosis / Efecto de derivados de tetrahidroquinolinas sobre la homeostasis del Ca2+ intracelular en células de cáncer de mama (MCF-7) y su relación con la apoptosis

Abstract Tetrahydroquinoline derivatives are interesting structures exhibiting a wide range of biological activities, including antitumor effects. In this investigation, the effect of the synthesized tetrahydroquinolines JS-56 and JS-92 on apoptosis, intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i), and the sarco(endo)plasmic reticulum Ca2+-ATPase (SERCA) activity was determined on MCF-7 breast cancer cells. Colorimetric assays were used to assess MCF-7 cells viability and SERCA activity. Fura-2 and rhodamine 123 were used to measure the intracellular Ca2+ concentration and the mitochondrial electrochemical potential, respec tively. TUNEL assay was used to analyze DNA fragmentation, while caspase activity and NF-κB-dependent gene expression were assessed by luminescence. In silico models were used for molecular docking analysis. These compounds increase intracellular Ca2+ concentration; the main contribution is the Ca2+ entry from the extracellular milieu. Both JS-56 and JS-92 inhibit the activity of SERCA and dissipate the mitochondrial electrochemical potential through processes dependent and independent of the Ca2+ uptake by this organelle. Furthermore, JS-56 and JS-92 generate cytotoxicity in MCF-7 cells. The effect of JS-92 is higher than JS-56. Both compounds activate caspases 7 and 9, cause DNA fragmentation, and potentiate the effect of phorbol 12-myristate-13-acetate on NF-κB-dependent gene expression. Molecular docking analysis suggests that both compounds have a high interaction for SERCA, similar to thapsigargin. Both tetrahydroquinoline derivatives induced cell death through a combination of apoptotic events, increase [Ca2+]i, and inhibit SERCA activity by direct interaction.

Resumen Los derivados de tetrahidroquinolina son estructuras interesantes que exhiben una amplia gama de actividades biológicas, incluyendo efectos antitumorales. Se determinó el efecto de las tetrahidroquinolinas sintetizadas JS-56 y JS-92 sobre la apoptosis, concentración intracelular de Ca2+ ([Ca2+]i) y la actividad Ca2+-ATPasa del retículo sarco(endo)plásmico (SERCA) en células de cáncer de mama MCF-7. Se usaron ensayos colorimétricos para evaluar la viabilidad de las células MCF-7 y la actividad SERCA. Se emplearon Fura-2 y rodamina 123 para medir la concentración de Ca2+ intracelular y el potencial electroquímico mitocondrial, respectivamente. El ensayo TUNEL se utilizó para analizar la fragmentación del ADN, mientras que la actividad de caspasas y la expresión génica dependiente de NF-κB se evaluaron mediante luminiscencia. Modelos in silico permitieron el análisis del acoplamiento molecular. Estos compuestos aumentan la concentración de Ca2+ intracelular; la principal contribución es la entrada de Ca2+ desde el medio extracelular. Tanto JS-56 como JS-92 inhiben la actividad de SERCA y disipan el potencial electroquímico mitocondrial a través de procesos dependientes e independientes de la captación de Ca2+ por este orgánulo. Además, JS-56 y JS-92 generan citotoxicidad en células MCF-7. El efecto de JS-92 es mayor que JS-56. Ambos compuestos activan las caspasas 7 y 9, provocan la fragmentación del ADN y potencian el efecto del 12-miristato-13-acetato de forbol en la expresión génica dependiente de NF-κB. El análisis de acoplamiento molecular sugiere que ambos compuestos tienen una alta interacción con SERCA, similar a la tapsigargina. Ambos derivados de tetrahidroquinolina indujeron la muerte celular a través de una combinación de eventos apoptóticos, aumento de [Ca2+]i e inhibición de la actividad SERCA por interacción directa.

Validez del Cuestionario de salud del paciente-9 (PHQ-9) para cribado de depresión en adultos usuarios de Atención Primaria en Bucaramanga, Colombia / Validity of the Patient Health Questionnaire-9 (PHQ-9) for depression screening in adult primary care users in Bucaramanga, Colombia

RESUMEN El Cuestionario de salud del paciente-9 (PHQ-9) es uno de los instrumentos de autoinforme más utilizado en Atención Primaria (AP). No existe validez de criterio del PHQ-9 en Colombia. El objetivo fue realizar la validez de criterio del PHQ-9 como instrumento de cribado en AP. Se realizó un estudio trasversal de validez de criterio de una escala usando como criterio de referencia la minientrevista neuropsiquiátrica (MINI) en usuarios adultos de centros de AP de ambos sexos. Se calcularon la consistencia interna y la validez convergente y de criterio del PHQ-9 mediante el análisis de las características operativas del receptor (COR) y el área bajo la curva (ABC). Participaron 243 pacientes, 184 (75,7%) fueron de sexo femenino. El promedio de edad fue 34,05 (mediana 31 y DE = 12,47). El α de Cronbach fue 0,80 y ω de McDonald, 0,81. La rho de Spearman fue 0,64 para HADS-D (p < 0,010) y 0,70 para PHQ-2 (p < 0,010). El ABC fue 0,92 (IC del 95%, 0,880-0,963). El punto de corte óptimo del PHQ-9 fue ≥ 7: sensibilidad de 90,38 (IC del 95%: 81,41-99,36); especificidad de 81,68 (IC del 95%: 75,93-87,42); el VPP 57,32 (IC del 95%: 46,00-68,63); el VPN 96,89 (IC del 95%: 93,90-99,88); índice de Youden 0,72 (IC del 95%: 0,62-0,82; LR+ 4,93 (IC del 95%: 3,61-6,74); LR- 0,12 (IC del 95%: 0,005-0,270). En conclusión, la versión colombiana del PHQ-9 es un instrumento válido y confiable para el cribado de depresión en AP de Bucaramanga, con un punto de corte ≥ 7.

ABSTRACT The patient health questionnaire-9 (PHQ-9) is one of the most widely used self-report instruments in primary care. There is no criterion validity of the PHQ-9 in Colombia. The objective was to validate the PHQ-9 as a screening tool in primary care. A cross-sectional, scale criterion validity study was performed using as reference criterion the mini neuropsychiatric interview (MINI) in male and female adult users of primary care centres. We calculated the internal consistency and convergent and criterion validity of the PHQ-9 by analysing the receiver operating characteristics (ROC) and the area under the curve (AUC). We analysed 243 participants; 184 (75.7%) were female. The average age was 34.05 (median of 31 and SD = 12.47). Cronbach's α was 0.80 and McDonald's ω was 0.81. Spearman's Rho was 0.64 for HADS-D (P <0.010) and 0.70 for PHQ-2 (P <0.010). The AUC was 0.92 (95% CI 0.880-0.963). The optimal cut-off point of PHQ-9 was ≥7: sensitivity of 90.38 (95% CI: 81.41-99.36); specificity of 81.68 (95% CI: 75.93-87.42); PPV 57.32 (95% CI: 46.00-68.63); NPV 96.89 (95% CI: 93.90-99.88); Youden index 0.72 (95% CI: 0.62-0.82); LR+ 4.93 (95% CI: 3.61-6.74); LR- 0.12 (95% CI: 0.005-0.270). In sum, the Colombian version of PHQ-9 is a valid and reliable instrument for depression screening in primary care in Bucaramanga, with a cut-off point ≥ 7.

Genética de la preeclampsia / Genetics of preclampsia

La preeclampsia es un trastorno hipertensivo específico del embarazo y es una de las principales causas de morbilidad y mortalidad materna y neonatal en todo el mundo, afectando 5 a 7% de todos los embarazos. En Colombia es la primera causa de morbilidad y mortalidad materna, siendo un problema de salud pública. Muchas investigaciones coinciden en que su origen se relaciona con la interacción entre factores genéticos y ambientales. Múltiples estudios han explorado factores genéticos tratando de identificar regiones cromosómicas y genes candidatos cuyas variantes se relacionen con una mayor susceptibilidad a la enfermedad. La presente revisión ofrece una visión general de los factores genéticos asociados a la preeclampsia.

Preeclampsia is a hypertensive disorder that occurs only during pregnancy and is one of the main causes of maternal and neonatal morbidity and mortality, affecting 5-7% of pregnancies. In Colombia it is the primary cause of maternal morbidity and mortality, and an important public health issue. Many investigations agree that its origin is related to the interaction of genetic and environmental factors. Numerous studies have explored genetic factors in attempt to identify chromosomal regions and candidate genes, variants of which are related with increased susceptibility to the disease. This review offers a general vision of the genetic factors associated with preeclampsia.

Carrier detection in Duchenne and Becker muscular dystrophy using dinucleotide repeat polymorphisms: a study in Mexican families

In order to improve carrier detection of Duchenne and Becker muscular dystrophy, denucleotide sequences repeats (CA) of introns 44, 45, 49 and 50 were used as well as two markers located at the 5' and 3' ends of the dystrophin gene. Haplotypes of the unaffected and affected persons of ten DMD/BMD Mexican families were determined. Fifty eight females were studied, 30 of whom were at-risk STR haplotypes. Furthermore, it was possible to identify a recombination event in the dystrophin gene in one family, and a gonadal mosaicism was found in another family

Analysis of dystrophin gene deletions in patients from the Mexican population with Duchenne/Becker muscular dystrophy

Forty unrelated Mexican patients with Duchenne/Backer muscular dystrophy were analyzed for intragenic DMD gene deletions, using the multiplex amplification of 15 deletion-prone oxons described by Chamberlain et al. and beggs et al. The percentage of deletions was 52.5 percent, and the majority of them (86.3 percent) were located at the hot spot deletion region which encompasses exons 44 - 55. This frequency is higher than that found in American and European populations. There were no correlations between deletion size, location and clinical severity

FIZ15 bacteriophage increases the adhesion of pseudomonas aeruginosa to human buccal epithelial cells

FIZ15 es un bacteriófago temperado que causa conversión lisogénica en la cepa PAO1 de Pseudomonas aeruginosa. Este fago induce un cambio superficial en el antigeno O de su lisógena ( que es el receptor fágico) el cual es responsable de que ésta presente una disminución en a sensibilidad a la fagocitosis y al efecto bactericida del suero. En este trabajo reportamos que al lisogenizar a la cepa PAO1 el fago FIZ15 aumenta 1.5 veces su adherencia in vitro a células bucopiteliales humanas mediante un mecanismo, adicional al mediado por pili, que requiere que las bacterias estén metabólicamente activas, puesto que el incremento en la adhesión que presentó la lisógena no ocurrió cuando se adicionó un desacoplante de la fosforilación oxidativa a la mezcla célula-bacteria durante el ensayo de adhesión, tratamiento que no afectó la adhesión de la cepa no lisógena. Una mutante espontánea de PAO1 resistente a FIZ15 (sin receptor fágico o con receptor alterado) mostró una adhesión 4 veces mayor que PAO1 en ausencia de desacoplante. Cuando se adicionó el desacoplante, la adhesión de la mutante que el antigeno O de Pseudomonas aeruginosa juega un importante papel en a adhesión de este bacilo a células bucopiteliales humanas mediante un mecanismo dependiente de energia y constituyen otro ejemplo de conversión lisogénica